Fluoresceindiacetat(FDA), med molekylformelen C24H16O7, CAS-nummer 596-09-8, molekylvekt 416.380, fremstår vanligvis som et lysegult pulver med god krystallinitet. Løseligheten i aceton er relativt høy, og når opp til 25 mg/ml. Imidlertid er det begrenset informasjon om dens løselighet i andre løsningsmidler, men det antas generelt at løseligheten påvirkes av løsemiddelpolaritet og temperatur. Det er en lipofil forbindelse som kan trenge gjennom cellemembranen i levende celler og hydrolyseres som et esterasesubstrat for å produsere fluorescerende fluorescein. Denne egenskapen gjør den allment anvendelig i felt som cellelevedyktighetsdeteksjon, mikrobiell deteksjon og enzymaktivitetsevaluering. Det avgir ikke lys selv, men fluoresceinet som produseres ved hydrolyse i levende celler kan avgi grønn fluorescens. Dens eksitasjons- og emisjonsbølgelengder er henholdsvis 488 nm og 530 nm, noe som gjør den til en ofte brukt fluorescerende sonde i flowcytometri og andre biologiske deteksjonsinstrumenter.
|
|
|
|
Kjemisk formel |
C24H16O7 |
|
Nøyaktig messe |
416 |
|
Molekylvekt |
416 |
|
m/z |
416 (100.0%), 417 (26.0%), 418 (2.7%), 418 (1.4%) |
|
Elementær analyse |
C, 69.23; H, 3.87; O, 26.90 |
Fluorescein diacetat(FDA) er et kjemisk stoff som er mye brukt innen biologi, medisin, miljøovervåking og industrielle felt.
Biologi og medisinsk forskning
1. Cellelevedyktighet og aktivitetsdeteksjon
(1) Flowcytometrianalyse: Som et esterasesubstrat kan det gå inn i levende celler gjennom cellemembranen og hydrolyseres til fluorescein av esteraser inne i cellene, og avgir grønn fluorescens. Derfor brukes det ofte i flowcytometri for å oppdage cellelevedyktighet og evaluere overlevelsesstatusen til celler ved å måle fluorescensintensitet.
(2) Vurdering av cytotoksisitet: I cytotoksisitetsstudier kan den brukes til å evaluere effekten av legemidler, kjemikalier osv. på celleaktivitet. Ved å sammenligne endringene i fluorescensintensiteten til celler før og etter behandling, kan det fastslås om disse stoffene har toksiske effekter på cellene.
2. Mikrobiell påvisning og identifikasjon
(1) Deteksjon av mikrobiell aktivitet: kan brukes til å oppdage mikrobiell aktivitet i miljøet, for eksempel total mikrobiell aktivitet i jord. Ved å måle fluorescensintensiteten produsert ved hydrolyse av FDA av mikroorganismer, kan aktivitetsnivået til mikroorganismer evalueres.
(2) Bakterie- og virusdeteksjon: I biologisk og medisinsk forskning kan den også brukes til å oppdage tilstedeværelsen av bakterier og virus. Gjennom spesifikke fargings- eller merketeknikker kan rask identifikasjon og telling av bakterier og virus oppnås.
3. Påvisning av biomarkører og enzymaktivitet
(1) Enzymaktivitetsevaluering: kan brukes som et substrat for forskjellige enzymer for å evaluere deres aktivitet. For eksempel kan det tjene som et fluorescerende substrat for human glutation S-transferase Pi (hGTP1-1), og aktiviteten kan evalueres ved å måle fluorescensintensiteten.
(2) Biomarkørdeteksjon: Ved sykdomsdiagnose kan den brukes til å oppdage tilstedeværelsen og nivået av visse biomarkører, for eksempel markører for kreftceller. Tidlig diagnose og behandlingsovervåking av sykdommer kan oppnås gjennom spesifikke deteksjonsmetoder.
Miljøovervåking
1. Overvåking av vannkvalitet
(1) Påvisning av mikroorganismer i vann: kan brukes til å oppdage mikroorganismer i vann, for eksempel levende Giardia-cyster. Ved å måle fluorescensintensiteten produsert ved hydrolyse av FDA av mikroorganismer i vannprøver, kan den mikrobielle forurensningen av vannkvaliteten evalueres.
(2) Algevitalitetsvurdering: I miljøovervåking kan den også brukes til å evaluere vitalitetsstatusen til alger i vannforekomster.
Ved å måle opptak og konverteringsevne til algeceller mot FDA, kan vekststatus og økologisk miljøkvalitet for alger bestemmes.
2. Jordovervåking
Jords mikrobiell aktivitet: Som nevnt tidligere, kan den brukes til å måle den totale mikrobielle aktiviteten i jord. Dette er av stor betydning for vurdering av helsetilstand og fruktbarhetsnivå til jordøkosystemer.
Industrielle applikasjoner
1. LED-utstyr
Fluorescerende materiale: Det kan brukes som et fluorescerende materiale i LED-enheter for å konvertere og justere lysfarge ved å absorbere lyset som sendes ut av LED og sende ut forskjellige farger av fluorescens.
2. Oljemerking
Fluorescerende merkemiddel: I petroleumsindustrien kan det brukes som et fluorescerende merkemiddel. Ved å legge det til petroleumsprodukter for å gi dem fluorescerende egenskaper, letter det identifisering og lokalisering i lekkasjedeteksjon, sporing og gjenvinningsprosesser.
Andre applikasjoner
1. Temperaturføling i medisinsk forskning
Temperaturfølsom sonde: Fluorescensegenskaper er temperaturfølsomme, derfor kan den brukes som en temperaturfølsom sonde i medisinsk forskning. Ved å måle endringer i fluorescensintensitet kan man oppnå sann-tidsovervåking av temperaturendringer i in vivo- eller in vitro-miljøet.
2. Behandling av iskemiske sykdommer
Behandling av iskemi: Studier har vist at det kan brukes til å behandle iskemiske sykdommer i visse situasjoner. Gjennom sin spesifikke biokjemiske mekanisme kan den fremme utvinning og reparasjon av iskemisk vev.
Syntesen avfluoresceindiacetat(FDA) er en kompleks, men viktig kjemisk prosess, og produktene har bred anvendelse innen biologi, medisin, miljøovervåking og andre felt.
Syntesen av FDA er vanligvis basert på fluorescein eller dets forløperforbindelser, som introduserer eddiksyregrupper gjennom forestringsreaksjoner. Forestringsreaksjon er en ofte brukt organisk syntesereaksjon, som vanligvis involverer reaksjonen av karboksylsyre og alkohol i nærvær av en syrekatalysator for å produsere estere. I syntese reagerer fluorescein eller dets forløper (som diacetylfluorescein) med eddiksyreanhydrid for å produsere stoffet.
1. Råvareforberedelse
Fluorescein:
Som et utgangsmateriale kan fluorescein syntetiseres eller kjøpes gjennom ulike metoder.
Eddiksyreanhydrid:
Som et acyleringsmiddel i forestringsreaksjoner må renhet og stabilitet sikres.
Katalysatorer:
Slik som pyridin og svovelsyre, brukes for å fremme forestringsreaksjoner.
Løsemiddel:
Slik som vannfri etanol, DMSO, etc., som brukes til å oppløse reaktanter og produkter, fremmer den jevne fremdriften av reaksjonen.
2. Forestringsreaksjon
(1) Reaksjonsbetingelser:
Vanligvis utført ved en viss temperatur (som 90-120 grader C) og trykk for å sikre grundig blanding og reaksjon av reaktanter.
(2) Driftstrinn:
Løs opp fluorescein i en passende mengde løsemiddel, tilsett eddiksyreanhydrid og katalysator, rør jevnt og varm opp og tilbakeløp i en periode (som flere timer). Kontinuerlig overvåking av reaksjonsforløpet er nødvendig under reaksjonsprosessen for å sikre fullstendig reaksjon.
(3) Etterbehandling:
Etter at reaksjonen er fullført, oppnås råproduktet gjennom trinn som filtrering, vasking og tørking. Deretter ble rensing utført ved bruk av metoder som rekrystallisering og kolonnekromatografi for å oppnå høy-FDA.
3. Spesifikke synteseeksempler
(1) Fremstilling av fluorescein:
For det første fremstilles fluorescein gjennom en rekke kjemiske reaksjoner. Denne prosessen kan omfatte trinn som smelting, tilsetning av sinkklorid, reaksjon, størkning, avkjøling, syrebehandling, vasking, tørking, etc.
(2) Forestringsreaksjon:
Ta en viss mengde fluorescein (som 6,3 g, ca. 0,02 mol), tilsett en passende mengde eddiksyreanhydrid (som 16 ml, ca. 5 ganger den teoretiske mengden) og katalysator (som pyridin), varm opp til en viss temperatur (som 90 grader C) i et oljebad, rør og bland jevnt. Hev deretter temperaturen gradvis til en høyere temperatur (som 120 grader C) og reager i en periode (som 7 timer).
(3) Etterbehandling:
Etter at reaksjonen er fullført, avkjøl naturlig til romtemperatur og filtrer for å oppnå råproduktet. Vask og tørk råproduktet for å oppnå det ferdige produktet.
Sikker drift:
Under synteseprosessen er giftige og skadelige kjemikalier som eddiksyreanhydrid og pyridin involvert. Det er nødvendig å operere i avtrekksskap og bruke passende verneutstyr (som vernebriller, laboratoriefrakker, hansker, etc.).
Kontroll av reaksjonstilstand:
Forestringsreaksjon er følsom for temperatur, trykk, reaksjonstid og andre forhold, og streng kontroll er nødvendig for å sikre jevn reaksjon og produktkvalitet.
Rensetrinn:
Rensetrinnene under etter-behandling er avgjørende for å oppnå høy-renhetsprodukter. Det er nødvendig å velge en passende rensemetode i henhold til den faktiske situasjonen og gjennomføre tilstrekkelig vaske- og tørkebehandling.
For å forbedre synteseeffektiviteten og produktrenheten kan syntesemetoden optimaliseres. For eksempel:
(1) Forbedring av katalysatorer:
Å velge passende katalysatorer kan øke hastigheten og utbyttet av forestringsreaksjoner.
(2) Optimalisering av reaksjonsbetingelser:
Ved å justere reaksjonstemperatur, trykk, tid og andre forhold, kan renheten og utbyttet av produktet forbedres ytterligere.
(3) Forbedring av rensemetoder:
Ved å ta i bruk mer effektive rensemetoder (som kromatografisk separasjon, membranseparasjon osv.) kan det forbedre renheten og gjenvinningshastigheten tilFluorescein diacetat.
Hva er bivirkningene av dette stoffet?
Cellelevedyktighetstesting:
FDA er mye brukt for cellelevedyktighetstesting fordi det kan gå inn i levende celler og brytes ned inne i cellene for å produsere fluorescens, noe som muliggjør en visuell vurdering av cellens levedyktighetsstatus.
Lav toksisitet:
Ved normale brukskonsentrasjoner har FDA lav toksisitet for celler og har vanligvis ikke signifikante negative effekter på cellene.
Celleskade:
Hvis konsentrasjonen av FDA er for høy eller behandlingstiden er for lang, kan det forårsake visse skader på celler. Dette kan skyldes påvirkningen av FDA eller dets nedbrytningsprodukter på permeabiliteten til cellemembraner eller intern metabolisme av celler.
Allergiske reaksjoner:
For enkelte individer kan FDA forårsake allergiske reaksjoner. Denne reaksjonen er vanligvis relatert til et individs konstitusjon og immunsystemstatus, men sannsynligheten for forekomst er relativt lav.
Miljøforurensning:
FDA må håndtere det riktig etter bruk for å unngå potensiell forurensning av miljøet og økosystemet.
Selv om FDA i seg selv ikke er et svært farlig kjemisk stoff, kan feil håndtering av kjemiske stoffer ha en negativ innvirkning på miljøet.
Konsentrasjonskontroll:
Når du bruker FDA for cellelevedyktighetstesting, bør konsentrasjonen og behandlingstiden kontrolleres strengt for å unngå unødvendig skade på celler.
Personlig beskyttelse:
Operatører bør bruke passende personlig verneutstyr som hansker, masker og briller når de bruker FDA for å forhindre direkte kontakt med hud, øyne eller luftveier.
Avfallshåndtering:
Etter bruk bør FDA-løsninger avhendes på riktig måte i henhold til relevante forskrifter for å sikre at de ikke forårsaker forurensning av miljøet.
FAQ
Hva er fluoresceindiacetat?
Fluoresceindiacetat (FDA) er definert somen fettsyreester som blir fluorescerende etter enzymatisk hydrolyse av acetyltransferaser i levende mykobakterielle celler, som muliggjør identifisering av levedyktige basiller i levedyktighetsanalyser.
Hva brukes fluorescein til?
Fluoresceininjeksjon brukesfor å hjelpe visse deler av øyet (f.eks. netthinnen, iris) til å bli mer synlige under øyemedisinske prosedyrer. Dette legemidlet skal kun gis av eller under direkte tilsyn av legen din. Dette produktet er tilgjengelig i følgende doseringsformer: Løsning.
Hva er fluoresceindiacetatanalysen?
Fluoresceindiacetat (FDA) erbrukes til å bestemme mikrobiell aktivitet. Bestemmelsen av denne aktiviteten kan utføres innenfor rammen av ulike studieobjekter ved bruk av jord, strø, torv, etc. Denne metoden er basert på en hydrolysereaksjon for å konvertere fluoresceindiacetat (FDA) til fluorescein
Populære tags: fluorescein diacetat cas 596-09-8, leverandører, produsenter, fabrikk, engros, kjøp, pris, bulk, til salgs