IPTG-reagens CAS 367-93-1

IPTG-reagensvi har fokusert på teknologien for organisk syntese siden 2008. Vi kan utvikle høy-kvalitetsprodukter, helt avhengig av vårt utsøkte FoU-team. IPTG, CAS 367-93-1, kjemisk struktur sammensatt av isopropyl - Den er sammensatt av D-tiogalaktosid- og fosfatgrupper. Blant dem, - D-tiogalaktosid er en analog av galaktose, der svovelatomet erstatter oksygenatomet. Denne spesielle glykosidstrukturen lar IPTG binde seg til DNA og indusere genuttrykk. IPTG har lav løselighet i vann, men kan løse seg godt i fysiologisk saltvann og fosfatbuffer. Den er sur med en pKa-verdi på 4,5, som er relatert til fosfatgruppen i dens molekylære struktur. Det er ikke lett å krystallisere i rent vann, men det kan danne krystaller i høykonsentrasjonsløsninger eller når andre forbindelser tilsettes. På grunn av sin evne til å indusere bakteriell proteinekspresjon, er IPTG følsom for visse mikroorganismer.

Vi gjør ingen skam på Great Chemistry! Ikke stol på den urimelige prisen, sammenlign prisen i samme kvalitet.

Biosyntesemetoden tilIPTG-reagensbruker vanligvis den katalytiske virkningen av mikroorganismer eller enzymer for å omdanne galaktose til isopropylgruppe- - D-tiogalaktosid.

Galaktose som råstoff

For det første er det nødvendig å bruke galaktose som råstoff. Galaktose er et sukker med fem karbonatomer som er mye tilstede i naturen og kan fås i form av sirup eller krystaller. I biosyntese omdannes galaktose til isopropyl gjennom en rekke enzymatiske reaksjoner- - D-tiogalaktosid.

Mikrobiell kultur og galaktosemetabolisme

Deretter er det nødvendig å velge passende mikroorganismer som katalysatorer, som vanligvis inkluderer bakterier, gjær og muggsopp. Dyrk disse mikroorganismene i et kulturmedium for å la dem vokse og reprodusere under passende forhold. I mellomtiden blir galaktose, som et næringsstoff, konsumert av mikroorganismer og metabolisert til det ønskede mellomproduktet gjennom en rekke enzymatiske reaksjoner. Den spesifikke reaksjonsmekanismen og kjemiske ligningen i dette trinnet varierer avhengig av typene mikroorganismer og dyrkingsforhold.

Isomeriseringsreaksjon genererer isopropylgruppe- - D-tiogalaktosid-5 '- fosfatester

Under påvirkning av enzymer produsert av mikroorganismer, gjennomgår mellomprodukter en isomeriseringsreaksjon, og genererer isopropylgrupper- - D-tiogalaktosid-5 '- fosfatester. Reaksjonsmekanismen i dette trinnet er å overføre hydroksylgruppen til galaktose til uridintrifosfat, og generere isopropylgruppe- - D-tiogalaktosid-5'-fosfat og uridindifosfat. Den spesifikke kjemiske ligningen er som følger:

(CH₂OH)₂CHOH-OH + C₃H₇ClN₂O₂S + UDP → (CH₂OH)₂CHOH-O-P(U) + C₁₀H₁₅N₅O₁₀P₂ + C₃H₇N

Avbeskyttelsesgruppe genererer isopropylgruppe- - D-tiogalaktosid

Det siste trinnet er å fjerne den beskyttende gruppen fra isopropylgruppen- - Konvertering av D-tiogalaktosyl-5 '- fosfatester til målproduktet isopropyl- - D-tiogalaktosid. Dette trinnet krever vanligvis bruk av en syre- eller alkaliløsning som en katalysator for å fremme reaksjonen. Den spesifikke kjemiske ligningen er som følger:

(CH₂OH)₂CHOH-O-P(U) + H₂O → (CH₂OH)₂CHOH-OH + P (i)

Separasjon og rensing

Ved å bruke separasjons- og renseteknikker som ekstraksjon, adsorpsjon, kromatografi, etc., blir målproduktet isopropyl renset- - D-tiogalaktosid ble ekstrahert fra reaksjonsblandingen. Hensikten med dette trinnet er å fjerne urenheter og forbedre renheten til produktet for å møte behovene til praktiske applikasjoner

IPTG-reagensIsopropyl- -D-tiogalaktosid, engelsk navn IPTG. Som placebo-induktor er X-gal et kromogent substrat, som begge brukes til blå-hvit screening. IPTG kan indusere DNA-segmentet av lac-operonet til Chemicalbook-vektoren til å syntetisere det amino-terminale fragmentet av -galaktosidase, som kan oppnå intragen komplementering (komplementering) med den defekte -galaktosidasen kodet av vertsceller.

1. Forberedelse av biomateriale:

IPTG kan brukes til å fremstille visse biomaterialer, som polysakkarider, liposomer osv. Ved å binde seg til spesifikke cellemembraner eller proteiner kan IPTG fremme spesifikke fysiologiske funksjoner til celler eller vev, og gi nye forskningsverktøy og terapeutiske strategier for feltet biomedisinsk ingeniørfag. For eksempel, ved å bruke IPTG som en induser, kan det fremme uttrykk og sekresjon av målproteiner i konstruksjonsbakterier eller gjærceller, som kan brukes til å produsere biomaterialer med spesifikke funksjoner.

 

Disse biomaterialene kan inkludere polysakkarider, liposomer, proteinkomplekser, etc.
I prosessen med å tilberede biomaterialer kan bruken av IPTG forenkle produksjonsprosessen, forbedre produksjonseffektiviteten og redusere produksjonskostnadene. Samtidig kan presis regulering av målproteinekspresjonsnivåer og biomaterialegenskaper oppnås ved å kontrollere mengden og varigheten av IPTG-tilsetning.

2. Legemiddelscreening:

 

IPTG brukes hovedsakelig i medikamentscreening for å indusere ekspresjonen av målgener og screene ekspresjonsproduktene til målgener. Spesifikt kan IPTG tjene som en induser av laktoseoperoner ved å binde seg til lac|produkter som forårsaker konformasjonsendringer av lac|produkter vekk fra lacO, og aktiverer derved transkripsjon og oppnår høy ekspresjon av målgenet. Under den blå hvite screeningsprosessen induseres transformanter uten rekombinante plasmider av IPTG for å danne blå kolonier i nærvær av kromogent substrat X-gal.

Når fremmede fragmenter settes inn, går de resulterende peptidfragmentene tapt Komplementær evne: Transformerte rekombinanter som inneholder rekombinante plasmider kan kun danne hvite Escherichia coli på kromogent induksjonsmedium. Denne metoden for medikamentscreening basert på fargeendringer spiller en viktig rolle i å studere proteiner relatert til spesifikke sykdommer og søke etter nye medikamentmål.

3. Genetisk forskning:

 

IPTG brukes ofte som et molekylært verktøy i genetisk forskning. Ved å binde seg til en spesifikk gensekvens kan IPTG regulere ekspresjonsnivået til det genet, og dermed studere dets forhold til spesifikke fenotyper eller sykdommer.
I genetisk forskning brukes IPTG hovedsakelig som induser og kan simulere induksjonseffekten av laktose på laktase. Det brukes vanligvis til å indusere uttrykk for eksogene gener, spesielt innen molekylærbiologi og genteknologisk forskning.
Ved bruk av IPTG binder det seg til målgener i ekspresjonsverter som Escherichia coli. Ved å konstruere målgenet med passende promotere og regulatoriske elementer inn i ekspresjonsvektoren, kan det produsere proteiner i Escherichia coli-celler. Denne induserte effekten er av stor betydning for å studere genfunksjon, proteininteraksjoner og utvikling av nye medikamenter og biomaterialer.

I tillegg kan IPTG også brukes som en induktor i proteinkrystalliseringsforsøk for å fremme proteinkrystallisering. Virkningsmekanismen er å endre konformasjonen av proteiner ved å binde seg til hydrofobe områder i proteiner, og dermed fremme aggregering og krystallisering mellom proteinmolekyler.

Denne aggregerings- og krystalliseringsprosessen er reversibel, så proteinkrystallisering kan induseres ved å tilsette IPTG, eller proteinkrystaller kan oppløses ved å fjerne IPTG.

4. Landbruksapplikasjon:

 

I landbruksapplikasjoner,IPTG-reagenssom en ny type biopesticid, har ugressmiddelspesifikke effekter. Det kan forstyrre den normale metabolismen av galaktose i planter, og dermed påvirke deres normale vekst. Denne interferensmetoden er mer følsom for enkelte ugress, så bruk av IPTG kan effektivt fjerne ugress uten å skade avlinger. I mellomtiden, ettersom IPTG er en ny type biopesticid, har den bedre miljøvennlighet og høyere sikkerhet for mennesker og dyr sammenlignet med tradisjonelle kjemiske plantevernmidler. Derfor har IPTG brede bruksmuligheter i landbruksapplikasjoner.

Potensiell interferens med regulering av genuttrykk

 

Ikke-spesifikk induksjon

IPTG, som en induktor, har en viss spesifisitet i sin handling, men ikke-spesifikk induksjon kan forekomme i noen tilfeller. IPTG induserer ikke bare ekspresjonen av målgener, men kan også påvirke ekspresjonen av andre gener i celler. Dette kan skyldes det faktum at etter at IPTG binder seg til repressorproteinet, endrer det konformasjonen og funksjonen til repressorproteinet, noe som får det til å ha visse effekter på andre operoner, og dermed lindrer hemmingen av ikke-målgenekspresjon.

Ikke-spesifikk induksjon kan føre til endringer i intracellulære proteinekspresjonsprofiler, og produsere uventede proteiner som ikke bare forstyrrer analysen og bedømmelsen av eksperimentelle resultater, men kan også ha negative effekter på de normale fysiologiske funksjonene til celler. For eksempel, i noen proteinekspresjonseksperimenter, etter induksjon med IPTG, i tillegg til å oppdage en økning i ekspresjonen av målproteinet, ble det også funnet oppregulering av ekspresjonen av noen andre ukjente proteiner. Disse ikke-spesifikke uttrykte proteinene kan forstyrre rensingen og funksjonelle studier av målproteinet.

Irreversibilitet av indusert uttrykk

Under normale omstendigheter, etter fjerning av induktoren, bør genekspresjonen gå tilbake til før-induksjonsnivået. Imidlertid har studier vist at IPTG-indusert genuttrykk kan ha en viss grad av irreversibilitet. Når IPTG er brukt til å indusere genekspresjon, selv om IPTG er fjernet, kan genekspresjonsnivået fortsatt forbli på et høyt nivå og kan ikke gjenopprettes til grunnlinjenivået før induksjon.

Denne irreversibiliteten kan skyldes langsiktige- intracellulære endringer indusert av IPTG, for eksempel endringer i kromatinstrukturen og modifikasjoner av transkripsjonsfaktorer, som opprettholder et høyt nivå av transkripsjonell aktivitet. Irreversibiliteten til indusert ekspresjon kan forårsake store vanskeligheter i eksperimenter, spesielt i eksperimenter som krever presis regulering av genekspresjonsnivåer, noe som kan føre til unøyaktige og ikke-reproduserbare eksperimentelle resultater.

Basert på sin stabile molekylære struktur og pålitelige induserende aktivitet, har IPTG blitt et uunnværlig reagens i molekylærbiologiske laboratorier over hele verden. Det er mye brukt i rekombinant proteinuttrykk, forskning på genfunksjoner og mikrobielle ingeniøreksperimenter, og gir stabile induksjonseffekter for vitenskapelig forskning og industriell produksjon. Vårt langsiktige-fokus på organisk synteseteknologi og streng kvalitetskontroll sikrer at IPTG-produktene våre opprettholder høy renhet, stabilitet og konsistens, og oppfyller effektivt de krevende kravene til vitenskapelige eksperimenter og industrielle applikasjoner.

Støttet av et profesjonelt FoU-team, fortsetter vi å optimalisere synteseprosesser og forbedre produktytelsen for bedre å betjene globale forskere og produsenter. Med sin klare virkningsmekanisme, stabile egenskaper og brede anvendelighet, vil IPTG forbli en kjernereagens innen biovitenskapelig forskning, og vi vil fortsette å tilby høy-kvalitetsprodukter og profesjonell teknisk støtte for å fremme bioteknologi.

Populære tags: iptg reagent cas 367-93-1, leverandører, produsenter, fabrikk, engros, kjøp, pris, bulk, til salgs