Shaanxi BLOOM Tech Co., Ltd. er en av de mest erfarne produsentene og leverandørene av 3xflag peptid cas 402750-12-3 i Kina. Velkommen til engros bulk høykvalitets 3xflag peptid cas 402750-12-3 for salg her fra vår fabrikk. God service og rimelig pris er tilgjengelig.
3XFLAG Peptider en viktig peptidmarkørsekvens som er mye brukt i proteinekspresjon og renseprosesser i biomedisinsk forskning. Molekylformel C120H169N31O49S, CAS 402750-12-3. Sammensatt av 23 aminosyrer, inneholder dens sekvens tre gjentatte Asp Tyr Lys Xaa Xaa Asp-motiver, som gir den spesifikke strukturelle egenskaper.
Har god løselighet i spesifikke løsemidler. For eksempel, i DMSO er løseligheten høy, noe som gjør den praktisk for operasjoner og eksperimenter i løsning. I tillegg kan den også oppnå god oppløsningseffekt i vann gjennom mild oppvarming. Den har også noen spesielle egenskaper. For eksempel har den god antigenisitet og reaktivitet, og kan binde seg til spesifikke anti-FLAG-antistoffer. Denne bindingsevnen gjør den allment anvendelig i eksperimenter som immunutfelling. Ved konkurrerende binding til Anti-FLAG-antistoffer, kan det FLAG-fusjonsuttrykte proteinet som binder seg til Anti-FLAG-antistoffer elueres under immunutfelling, og derved oppnå lokalisering, deteksjon og rensing av målproteinet.
|
Tilpassede flaskekorker og korker:
|
|


|
Kjemisk formel |
C120H169N31O49S |
|
Nøyaktig messe |
2860 |
|
Molekylvekt |
2862 |
|
m/z |
2861 (100.0%), 2860 (77.0%), 2862 (32.9%), 2862 (31.4%), 2863 (22.1%), 2862 (11.5%), 2863 (10.1%), 2861 (8.8%), 2864 (8.1%), 2862 (7.8%), 2863 (7.4%), 2863 (5.3%), 2863 (4.5%), 2862 (3.5%), 2864 (3.3%), 2864 (3.2%), 2865 (2.2%), 2865 (2.1%), 2864 (2.1%), 2862 (1.9%), 2862 (1.9%), 2861 (1.5%), 2864 (1.5%), 2861 (1.4%), 2864 (1.4%), 2863 (1.2%), 2864 (1.2%) |
|
Elementær analyse |
C, 50.36; H, 5.95; N, 15.17; O, 27.39; S, 1.12 |

3XFLAG Peptider et merke som brukes i proteinforskning, bestående av 8 aminosyrer med sekvensen DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK. Dens hovedfunksjon er å tjene som en markør for proteinuttrykk og rensing, og gir et praktisk og effektivt middel i forskning.

1. Affinitetsrensing:
Det kan brukes som et merke for proteinrensing, og gjennom sin høye affinitet med anti-FLAG-antistoffer kan målproteinet enkelt renses. Vanligvis blir målproteinet co-transfektert inn i celler med en ekspresjonsvektor som inneholder 3X FLAG PEPTIDE, og deretter renset ved affinitet ved bruk av anti-FLAG-antistoffer for raskt og effektivt å oppnå et målprotein med høy renhet.
2. Immunologisk testing:
På grunn av sin høye immunogenisitet kan den brukes til å oppdage proteinekspresjon og lokalisering. Ved å bruke spesifikke anti-FLAG-antistoffer, kan eksperimentelle teknikker som immunblotting og immunfluorescensfarging utføres for raskt og nøyaktig å detektere ekspresjonsnivået og distribusjonen av målproteiner.

3. Klonfiltrering:
Den kan også brukes for enkelhets skyld med proteinklonscreening. I konstruksjonsprosessen av proteinekspresjonsvektorer kan det å koble gensekvensen til målproteinet med 3XFLAG-sekvensen lette screeningen av positive kloner med målproteinet gjennom immundeteksjon og andre metoder, og derved akselerere prosessen med proteinfunksjonsforskning.
4. Immunutfelling:
Den kan også brukes til proteinimmunutfellingseksperimenter. Ved å binde proteiner som inneholder 3X FLAG PEPTIDE-merker til anti-FLAG-antistoffer, og deretter bruke adsorpsjonsmaterialer som protein A/G-agarose eller magnetiske perler, kan målproteinet og dets interagerende partnere selektivt presipiteres fra celleekstrakter for å studere proteininteraksjonsnettverket.


5. Legemiddelscreening:
Det kan også brukes i narkotikascreeningsforskning. Ved å kombinere 3X FLAG PEPTIDE-taggen med proteinet av interesse, kan høy-screening av proteinet oppnås. Denne screeningsmetoden kan brukes til å oppdage nye medikamentmål, evaluere legemiddelproteininteraksjoner og så videre.
6. Proteinfunksjonsforskning:
Innføringen av etiketter påvirker ikke den naturlige strukturen og funksjonen til proteiner nevneverdig, og kan derfor brukes til å studere de biologiske funksjonene, subcellulær lokalisering, interaksjoner og signaltransduksjon av proteiner. Ved å introdusere 3X FLAG PEPTIDE-taggen, kan det utføres-dypende forskning på de biologiske egenskapene til proteiner, noe som bidrar til å avsløre deres virkningsmekanismer i cellulær biologi og fysiologi.


3XFLAG Peptider et peptid som inneholder 8 aminosyrer, med sekvensen DYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK. Det brukes ofte som et proteinmerke for praktisk rensing, påvisning og forskning av målproteiner. I prosessen med biosyntese kan den fremstilles gjennom kjemisk syntese eller genteknologiske metoder. Følgende er de detaljerte trinnene for genteknologiske metoder:
1. Design og syntetiser gener:
For det første er det nødvendig å designe et kunstig gen som inneholder 3X FLAG PEPTIDE-sekvensen. Dette genet bør inneholde 3X FLAG PEPTIDE-sekvensen, samt passende promotere, terminatorer og seleksjonsmarkører (som antibiotikatoleransegener). Utformingen av gener bør ta hensyn til egenskapene og uttrykksbehovene til målverten.
2. Genkloning:
Deretter vil de utformede kunstige genene bli klonet inn i passende ekspresjonsvektorer. Vanlig brukte vektorer inkluderer plasmider, virale vektorer osv. Kloningsprosessen inkluderer vanligvis følgende trinn:
-PCR-amplifikasjon: Bruk av polymerasekjedereaksjon (PCR) for å amplifisere målgensekvensen fra mal-DNA.
-Fordøyelse og kobling: PCR-produkter fordøyes med ekspresjonsvektorer ved bruk av restriksjonsendonukleaser, og kobles deretter sammen med DNA-ligaser.
-Transformasjon: Transformering av den koblede ekspresjonsvektoren til bakterielle verter som Escherichia coli for å danne et rekombinant plasmid.
-Identifisering: Rekombinante plasmider ble identifisert gjennom PCR, enzymfordøyelse, DNA-sekvensering og andre metoder for å bekrefte at målgenet har blitt klonet inn i vektoren.
3. Uttrykksmålprotein:
Transfekter den konstruerte ekspresjonsvektoren inn i målvertsceller, slik som pattedyrceller, gjærceller, insektceller osv. Inne i celler transkriberes ekspresjonsvektoren til mRNA og deretter oversettes til proteiner . 3X FLAG PEPTIDE vil uttrykkes sammen med målproteinet som en protein-tag.
4. Proteinekstraksjon:
Samle transfekterte celler og utfør cellefragmentering, sentrifugering og andre behandlinger for å oppnå det totale proteinekstraktet.
5. Renset protein:
Ved å bruke affinitetsrenseteknikker som immunutfelling og affinitetskromatografi, ble målproteiner som inneholdt 3X FLAG PEPTIDE-merker renset fra det totale ekstraktet. Dette innebærer vanligvis å binde anti-FLAG-antistoffer til proteiner som inneholder 3X FLAG-PEPTIDE, og deretter separere dem ved hjelp av affinitetskromatografikolonner eller magnetiske perler.
6. Identifiser proteiner:
Det rensede proteinet ble identifisert og kvantifisert ved SDS-PAGE gelelektroforese, immunblotting, massespektrometri og andre teknologier for å sikre dets renhet og integritet.
Bivirkninger
I biomedisinsk forskning og proteinrelaterte eksperimenter spiller tag-peptider en avgjørende rolle. De kan hjelpe forskere med å rense, oppdage og lokalisere målproteiner, og i stor grad fremme utviklingen av proteinvitenskap.3XFLAG Peptider et vanlig og mye brukt tag-peptid sammensatt av tre gjentatte FLAG-tag-sekvenser. FLAG-taggen ble opprinnelig designet av Hopp et al. i 1988, og senere utviklet seg til varianter som 3XFLAG, som har høy affinitet og spesifisitet og kan binde seg til spesifikke antistoffer, noe som letter etterfølgende isolasjon og identifikasjon. Selv om 3XFLAG har brakt mange bekvemmeligheter i eksperimenter, som andre biologiske midler, kan det også forårsake noen bivirkninger.
Immunrelaterte bivirkninger
Immunogenisitet
Immunogenisitet refererer til evnen til et stoff til å stimulere kroppens immunsystem til å produsere en immunrespons. 3XFLAG, som et eksogent peptidsegment, kan gjenkjennes av kroppens immunsystem som en "ikke-selv"-komponent, og derved utløse en immunrespons. Selv om 3XFLAG-sekvensen er relativt kort, kan den i noen tilfeller fortsatt aktivere B-celler og T-celler, noe som fører til produksjon av antistoffer. Disse antistoffene binder seg ikke bare til det frie 3XFLAG, men kan også gjenkjenne og binde seg til fusjonsproteiner som uttrykker 3XFLAG-merket, noe som påvirker den normale funksjonen og distribusjonen av fusjonsproteinet.
Allergiske reaksjoner
Allergisk reaksjon er en unormal immunrespons forårsaket av at immunsystemet er for følsomt for visse allergener. Enkeltpersoner kan oppleve allergiske reaksjoner når de bruker 3XFLAG til eksperimentering eller behandling. Alvorlighetsgraden av symptomene på allergiske reaksjoner varierer. Milde tilfeller kan vise seg med lokale symptomer som kløe, utslett og erytem, mens alvorlige tilfeller kan utløse systemiske allergiske reaksjoner som anafylaktisk sjokk, preget av et kraftig blodtrykksfall, pustevansker og bevissthetstap, noe som utgjør en alvorlig trussel mot livssikkerheten.
Allergiske reaksjoner
Mekanismen for allergiske reaksjoner er hovedsakelig relatert til IgE-antistoffer i immunsystemet. Når kroppen først kommer i kontakt med 3XFLAG, gjenkjenner immunsystemet det som et allergen og stimulerer B-celler til å produsere spesifikke IgE-antistoffer. Disse IgE-antistoffene fester seg til overflaten av mastceller og eosinofiler. Når kroppen kommer i kontakt med 3XFLAG igjen, binder den seg til IgE-antistoffer på celleoverflaten, og utløser mastceller og eosinofiler til å frigjøre bioaktive mediatorer som histamin og leukotriener, noe som fører til forekomst av allergiske symptomer.
Risiko for autoimmune sykdommer
Langvarig eller gjentatt eksponering for 3XFLAG kan øke risikoen for å utvikle autoimmune sykdommer. Autoimmune sykdommer refererer til en type sykdom der kroppens immunsystem feilaktig angriper sitt eget vev og organer, noe som resulterer i vevsskade og funksjonsnedsettelse. 3XFLAG kan indusere immunsystemet til å produsere kryssreaktive antistoffer og T-celler gjennom en molekylær simuleringsmekanisme, der aminosyresekvensen er lik sekvensen til enkelte proteiner i kroppen.

Disse immuncellene og antistoffene angriper ikke bare det fremmede 3XFLAG, men skader også utilsiktet kroppens normale vev, noe som fører til autoimmune sykdommer. For eksempel kan visse autoimmune sykdommer som systemisk lupus erythematosus og revmatoid artritt være relatert til autoimmune reaksjoner indusert av eksogene stoffer. Selv om det foreløpig ikke er noen klare bevis som tyder på at 3XFLAG direkte forårsaker autoimmune sykdommer, kan ikke denne potensielle risikoen ignoreres.
Påvirkning på cellulær funksjon
I noen eksperimentelle studier har det blitt funnet at høye konsentrasjoner av 3XFLAG kan ha toksiske effekter på celler. Manifestasjoner av cytotoksisitet inkluderer endringer i cellemorfologi, forstyrrelse av cellemembranintegritet, endringer i intracellulær enzymaktivitet og hemming av celleproliferasjon. Virkningsmekanismen kan være relatert til interaksjonen mellom 3XFLAG og cellemembranen. På grunn av den sterke negative ladningen til 3XFLAG,

det kan binde seg til positivt ladede komponenter på cellemembranen gjennom elektrostatiske interaksjoner, endre permeabiliteten og fluiditeten til cellemembranen, føre til lekkasje av intracellulære stoffer eller inntreden av skadelige stoffer fra utsiden, og dermed påvirke cellens normale fysiologiske funksjoner. I tillegg kan 3XFLAG også komme inn i det indre av celler, forstyrre signalveier, proteinsyntese og andre prosesser, noe som ytterligere forverrer celleskade.
Effekter på cellulære signalveier
3XFLAG kan forstyrre intracellulære signalveier og påvirke normale fysiologiske aktiviteter til celler. Den cellulære signalveien er en samlebetegnelse for en rekke molekylære hendelser der celler reagerer på ytre stimuli, og regulerer viktige prosesser som cellevekst, differensiering og apoptose.


For eksempel kan det binde seg til reseptorer på celleoverflaten, kompetitivt hemme bindingen av naturlige ligander til reseptorer og blokkere signaloverføring; Alternativt kan den gå inn i cellen og binde seg til signaltransduksjonsproteiner, og påvirke proteinfosforylering, defosforylering og andre modifikasjonsprosesser, og forstyrre signaloverføring og amplifikasjon. Denne interferensen med cellulære signalveier kan føre til cellulær dysfunksjon, som påvirker prosesser som celleproliferasjon, differensiering og apoptose, som igjen kan ha negative effekter på normal utvikling og funksjon av vev og organer.
Effekter på cellulær metabolisme
Cellulær metabolisme er den generelle betegnelsen for en rekke kjemiske reaksjoner som oppstår i cellene, og gir energi og materiell grunnlag for cellulære livsaktiviteter. 3XFLAG kan påvirke cellulære metabolske prosesser, forstyrre cellulær energiproduksjon og substanssyntese. For eksempel kan det påvirke funksjonen til mitokondrier, som er hovedstedene for aerob respirasjon og energiproduksjon i celler. 3XFLAG kan endre mitokondriell membranpermeabilitet og potensial ved å interagere med proteiner eller lipider på membranen, påvirke mitokondriell respirasjonskjedefunksjon og ATP-syntese,

fører til utilstrekkelig mobilenergiforsyning. I tillegg3XFLAG Peptidkan også forstyrre intracellulære prosesser som glukosemetabolisme og lipidmetabolisme, påvirke balansen mellom substanssyntese og nedbrytning i cellene, og ha en negativ innvirkning på cellenes normale fysiologiske funksjoner
Ofte stilte spørsmål
Hva er et 3X FLAG?
+
-
3X FLAG Peptide er et syntetisk peptid med 23 aminosyrerester. Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp-motivet gjentas tre ganger i peptidet. Åtte aminosyrer ved C-terminalen utgjør den klassiske FLAG-sekvensen (Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys).
Hva er forskjellen mellom flagg-tag og 3xflag?
+
-
Flag-tag er en enkelt sekvens på 8 aminosyrer som vanligvis brukes i immunutfelling, western blot og immunfluorescensapplikasjoner. Derimot inneholder 3x Flag-tag 22 aminosyrer, noe som gir den en større affinitet for anti-Flag-antistoffer, og gjør den spesielt fordelaktig for arbeidsflyter for proteinrensing.
Hvordan løse opp 3X FLAG?
+
-
For å tilberede en stamløsning, løs i TBS (50 mM Tris-HCl, pH 7,4, med 150 mM NaCl) i en konsentrasjon på 5 mg/ml. Alikvoter og oppbevar ved –20 grader. Gjentatt frysing og tining anbefales ikke.
Populære tags: 3xflag peptide cas 402750-12-3, leverandører, produsenter, fabrikk, engros, kjøp, pris, bulk, til salgs




